Npl4 识别多泛素链长度，并在 p97/VCP 上受 D1 门控交换

研究团队开发单分子泛素识别与动力学方法 smUbiRAD，发现 Npl4 对 K48 连接泛素链存在明显的链长阈值：短链上 Npl4 仅瞬时结合，而在四泛素和五泛素上转为长时程的多价结合。Ufd1 与 p97 主要通过抑制 Npl4 解离来稳定复合物，不影响最初的相遇过程。在完整组装的 p97-Ufd1-Npl4-底物复合物中，驱动 Npl4 快速交换的是 D1 的 ATP 水解而非 D2，支持 D1 供能的构象变化促进 Npl4 而非 Ufd1 周转、并门控下游 D2 驱动底物处理的模型。