化学诱变结合全基因组测序解析抗利什曼病氨基吡唑的作用靶点 LINF_180011100

研究通过化学诱变结合氨基吡唑选择压力和全基因组测序，锁定 LINF_180011100 的 C 端 FYVE 锌指结构域为抗利什曼病氨基吡唑的作用靶点。从 28 株耐药虫株中发现，该结构域多个独立杂合突变与 >10–49 倍耐药相关；基因过表达和 CRISPR-Cas9 编辑独立验证了 10–30 倍耐药关联。GFP 融合与 Rab5-mCherry 部分共定位显示该蛋白主要定位于内吞囊泡；原位靶点结合实验证实氨基吡唑的选择性作用可被耐药突变消除，生物物理实验进一步证明先导化合物与该重组 FYVE 锌指结构域直接互作。